Responsable de la elaboración de este Protocolo:
MARTINEZ PASTUR Guillermo. CADIC-CONICET.
Laboratorio de Propagación y Producción Vegetal. E-mail: cadicforestal@gmx.net
Especie: Nothofagus pumilio (Poepp. et Endl.) Krasser
“lenga”
Vía de regeneración: Organogénesis directa
Establecimiento de los cultivos:
a)
Explante utilizado: segmentos nodales de 1-2 cm de largo conteniendo el
ápice y 2 hojas, obtenidos de renovales de 10 a 15 años de edad de un bosque
natural situado en las cercanías de la ciudad de Ushuaia (54°48' LS, 68°19' LO).
b) Desinfección
del explante: NaOCl (1,0 % Cl2 activo) por 5 minutos y posterior
enjuague con agua destilada estéril en cámara de flujo laminar.
c) Medio
de cultivo para el establecimiento: Broadleaved Tree Medium (BTM), adicionado
con 10-20 µM de 2iP por 4 a 6 meses. Los cultivos se mantuvieron en el cuarto
de crecimiento a 22 ± 2 °C con
un fotoperíodo de 16:8 h luz: oscuridad, usando lámparas fluorescentes (57 µmol
m-2 s-1 PAR).
a)
Explante utilizado: segmentos nodales de 1-2 cm de largo conteniendo el
ápice y 2 hojas.
b) Medio
de cultivo: BTM adicionado con 20-30 µM de 2iP y 0,3 µM GA3, por un
período de cultivo de 63 días y con subcultivos cada 21 días.
c)
Condiciones de incubación: Los cultivos se mantuvieron en el cuarto de
crecimiento a 22 ±2 °C con
un fotoperíodo de 16:8 h luz: oscuridad usando lámparas fluorescentes (57 µmol
m-2 s-1 PAR).
Enraizamiento:
a) Medio
de cultivo: BTM con los macronutrientes reducidos a la mitad,
adicionado con 0,61 a 1,23 µM IBA por 28 días.
b)
Condiciones de incubación Los cultivos se mantuvieron en el cuarto de
crecimiento a 22 ±2 °C con
10 días de oscuridad durante la inducción y luego un fotoperíodo de 16:8 h luz:
oscuridad usando lámparas fluorescentes (57 µmol m-2 s-1 PAR).
Aclimatación:
Las
plantas se mantuvieron en el cuarto de crecimiento a 22 ±2 °C con
un fotoperíodo de 16:8 luz: oscuridad usando lámparas fluorescentes (57 µmol m-2
s-1 PAR).
Rendimiento de este protocolo: datos de
eficiencia,
Desinfección: 80% de explantos
libre de contaminantes
Tasa de Multiplicación: 1: 3-5
Enraizamiento: 60-70%.
Rusticación: 43% de sobreviviencia
a los 45 días.
Observaciones:
Bibliografía:
MARTINEZ PASTUR G.; ARENA M.E.. 1997. Bosque 18 (2): 43-50.
Pagina web
del laboratorio o del autor: www.pastur.com.ar