Responsable de la elaboración de este Protocolo:

Ingrid Morales Benavent, Universidad Autónoma Gabriel René Moreno, Carrera de Biología. Fundación Amigos de la Naturaleza. Laboratorio germoFAN.

Casilla 4336, Santa Cruz, Bolivia. Ymorales1710@yahoo.com, imaybe@cotas.com.bo

Especie: Orquídeas (variasa especies)

Vía de regeneración: Especificar:

- Cultivo in vitro de semillas y brotes

Establecimiento de los cultivos:

a) Explante utilizado

§ Especificar : semillas, brotes.

§ .

b) Desinfección del explante: desinfección de la cápsula con alcohol 70%, hipoclorito de sodio al 2%, tres lavados con agua estéril. Desinfección de semillas, método jeringuilla, con hipoclorito sodio 2% y tres lavados con agua estéril.

c) Medio de cultivo para el establecimiento :

El medio que ha respondido en forma más adecuada tanto para el cultivo de las semillas y su desarrollo es MS sales macro 75%, MS sales micro 100%, vitaminas MS 100%, AG3 0,1 g/l, sacarosa 30 g/l, carbón activado 0,1 g/l, con 6 g/l de agar y pH 5,5.

d) Medio básico, hormonas, duración del establecimiento (depende de las especies de orquídeas)

e) condiciones de incubación 12 horas luz, 3000 lux, tubos fluorescentes. 23 +- 2 grados centígrado.

Subcultivo:

a) Explante: embriones germinados – transformados en protocormos

b) Medio de cultivo MS sales macro 75%, MS sales micro 100%, vitaminas MS 100%, AG3 0,1 g/l, sacarosa 30 g/l, carbón activado 0,1 g/l, con 6 g/l de agar y pH 5,5.

c) Condiciones de incubación: ídem anterior

Enraizamiento:

a) Medio de cultivo: ídem

b) condiciones de incubación ídem

Aclimatación:

Aclimatación en invernadero, en substrato estéril de semillas trituradas de cusi ( Attalea speciosa) palmera. Fertización foliar cada 15 días.

Rendimiento de este protocolo: datos de eficiencia,

Observaciones:

Bibliografía:

- MORALES, I, Menacho, E.; Quispe, F.; Nogales, S. 2004. Producción in in vitro y conservación de orquídeas en Bolivia. REDBIO 2004. IV Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología Agrícola. 21 –25 junio 2004. Santo Domingo, Republica Dominicana.

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