Responsable de la elaboración de este Protocolo:
ARENA Miriam
Elisabet. CADIC-CONICET. Laboratorio de Propagación y Producción
Vegetal. E-mail: arena1@infovia.com.ar
Especie: Berberis buxifolia Lam
“calafate”
Vía de regeneración: Organogénesis directa
Establecimiento
de los cultivos:
a)
Explante utilizado: segmentos nodales conteniendo el ápice y un nudo,
obtenidos a partir de plantas crecidas naturalmente en las cercanías de la
ciudad de Ushuaia (54°48' LS,
68°19' LO).
b) Desinfección
del explante: NaOCl (1,0 % Cl2 activo) por 5 minutos y posterior
enjuague con agua destilada estéril en cámara de flujo laminar.
c) Medio
de cultivo para el establecimiento: Murashige & Skoog adicionado
con 0,55 µM de BA por 6 meses. Los cultivos se mantuvieron en el cuarto de
crecimiento a 22 ± 2 °C con
un fotoperíodo de 16:8 h luz: oscuridad, usando lámparas fluorescentes (57 µmol
m-2 s-1 PAR).
a)
Explante utilizado: segmentos nodales conteniendo el ápice y un nudo.
b) Medio
de cultivo: Murashige & Skoog adicionado con 0,55 µM de BA, por un
período de cultivo de 63 días, con subcultivos cada 21 días.
c)
Condiciones de incubación: Los cultivos se mantuvieron en el cuarto de
crecimiento a 22 ±2 °C con
un fotoperíodo de 16:8 h luz: oscuridad usando lámparas fluorescentes (57 µmol
m-2 s-1 PAR).
Enraizamiento:
a) Medio
de cultivo: Murashige & Skoog con las sales macronutrientes
reducidas a la mitad con 1,25 µM IBA por 7 días, seguido por un medio libre de
IBA hasta el día 28.
b)
Condiciones de incubación Los cultivos se mantuvieron en el cuarto de
crecimiento a 22 ±2 °C con 7
días de oscuridad durante la inducción y luego un fotoperíodo de 16:8 h luz:
oscuridad usando lámparas fluorescentes (57 µmol m-2 s-1
PAR).
Aclimatación:
Las
plantas se mantuvieron en condiciones de invernáculo.
Rendimiento de este protocolo: datos de
eficiencia,
Desinfección: 13% de explantos
libre de contaminantes
Tasa de Multiplicación: 1:4,7
Enraizamiento: 80%
Rusticación: 70% de sobreviviencia
a los 2 meses
Observaciones:
Bibliografía:
ARENA M.E.; MARTINEZ PASTUR G.; VATER G.. 2000. Biocell 24
(1): 73-80.
Pagina web
del laboratorio o del autor: www.cadic.gov.ar