Responsable de la elaboración de este Protocolo: Silvia Karina Vila, Instituto de Botánica del Nordeste (IBONE), Laboratorio de Fisiología Vegetal, e-mail: skvila@agr.unne.edu.ar

Especie: Paraíso (Melia azedarach L)

Vía de regeneración: Embriogénesis directa

Establecimiento de los cultivos:

a) Explante utilizado :Embriones cigóticos inmaduros de 0,5- 1,5 mm de longitud, los frutos fueron colectados después de 8- 9 semanas de la polinización a fines de noviembre y principios de diciembre.

b) Desinfección del explante: Los frutos fueron desinfectados en etanol al 70% (durante 5 min.), seguido de su inmersión en NaOCl al 3,6 % + 2 gotas de Tween (durante 20 min.) y finalmente, fueron lavados con agua destilada estéril

c) Medio de cultivo para el establecimiento : MS + 1 mg/L de TDZ (thidiazuron)

- Medio básico, hormonas, duración del establecimiento Medio basal de Murashige y Skoog (1962), las hormonas usadas fueron TDZ, 2,4-D y BAP, La mayoría de los explantes diferenciaron embriones a los 15- 20 días

a) condiciones de incubación 27±2^oC, fueron incubados en luz con una intensidad lumínica de 116 mmol.m^-2. s^-1

Subcultivo:

a) Explante: embriones somáticos

b) Medio de cultivo: 1/4 MS con 3% de sacarosa

b) Condiciones de incubación 27±2^oC bajo una intensidad lumínica de 116 mmol.m^-2. s^-1

Aclimatación:

Las raíces de las plantas fueron lavadas con agua y transferidos a macetas con arena, musgo y perlita (1:1:1). Las plantas fueron mantenidas en un mist durante 20 días y luego transferidas a suelo.

Rendimiento de este protocolo: datos de eficiencia,

La eficiencia del sistema aún es baja

Observaciones:

Bibliografía:

S. Vila, A. Gonzalez, H. Rey y L. Mroginski. Somatic embryogenesis and plant regeneration from immature zygotic embryos of Melia azedarach (Meliaceae). In Vitro Cellular and Developmental Biology- Plant, Vol. 39. N^o 3 : 283- 287. 2003